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關于牛血清的一些常識

更新時間:2021-12-20  |  點擊率:664

科研實驗中,細胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細胞,如:干細胞、肝細胞,神經細胞,原代培養(yǎng)、細胞融合、轉染細胞等。

Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經過嚴格質控,每個批次附有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產日期,保質期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應等)、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

防止發(fā)病免疫血清多用馬、牛血液制備,馬、牛血清對其它動物來說,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,預防的主要措施是使用提純的制品,不用不合格的產品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求劑量使用,一次用量不可過大

關于牛血清的一些常識

1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數(shù)周,不宜室溫保存,不宜反復凍融。配制成*培養(yǎng)基后應在四周內用完,一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數(shù)量并冷凍保存。

2、 血清中的絮狀沉淀物:血清是多種蛋白質的混合物,在凍融過程中會出現(xiàn)絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成*培養(yǎng)基再過濾即可使用。

3、 血清的解凍:合理的解凍方式可以更好的保護血清質量并可以在zui大程度上減少絮狀沉淀物的產生。血清從低溫冰箱中取出后,經4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規(guī)則搖晃均勻融解,直至*融解后再使用。

4、 血清的熱滅活:將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統(tǒng)。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數(shù)細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞,刺激光滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時,建議使用熱滅活血清,在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用,甚至會因為加熱處理影響血清的質量。

5、 血清中的“小黑點"現(xiàn)象:血清在經過一段時間的低溫凍存再融解后,在正常情況下會出現(xiàn)絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點"現(xiàn)象,認為是微生物污染。實驗發(fā)現(xiàn)血清在37℃環(huán)境放置時間過長或經過加熱滅活處理,血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點",讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要,*可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。

實驗證明使用血清時注意以下幾點事項不但可以保證血清質量并能給使用者帶來方便:

◎ 在-15℃以下低溫保存。

◎ 一瓶血清一次無法用完的應分裝凍存,分次用完。

◎ 按-15℃以下至4℃至室溫至37℃逐步均勻解凍使用。

◎ 若非必要,無須進行熱滅活。若必須做血清熱滅活的,須嚴格控制在56℃水浴30分鐘均勻加熱滅活。



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